实验室技术和仪器,PCR仪工作原理利用升温使DNA变性

发布时间:17-05-05 16:53分类:行业资讯
标签:仪器,实验室装备展览会,2014深圳国际科学仪器及实验室装备展览会
据爱仪器仪表网了解到,2014年深圳国际科学仪器及实验室装备展览会将在深圳会展中心举行展会,简称SISE或深圳科仪展,历时3日(7月31日至8月2日),欢迎莅临。这次展会时我国*个盖革开发区–深圳特区举办的国际化、化行业盛会,还将同期举办多场学习交流会。展会会促使我国分析仪器、测试测量、生化技术、实验室建设及教育仪器行业的加快发展。该展览会包含很多领域范围,可分为分析领域、测量测试盒质量控制领域、实验室技术领域、生物技术和诊断、教育领域、应用领域等。各类智能化仪器仪表、水电气仪表、智能化仪器仪表与物联网技术等。2014年深圳国际科学仪器及实验室装备展览会主要范围详细介绍:分析领域:分析仪器设备,色谱,分光镜,显微镜和光学图像处理;测量测试和质量控制领域:控制工业质量控制,材料测试,材料鉴定;实验室技术领域:实验室主设备,实验室设备器械,实验室数据库系统和文档管理,实验室技术和仪器,化
学制品和试剂;生物技术和诊断:药剂和诊断,生物技术仪器,生物化学,生物技术和生命科学之实验室技术;教育领域:远程教育、教学设备仪器、高职教仪器及实验室装备;应用领域:工业、制造业、食品饮料、环境、制药、实话、保健其中还包含工业自动化装备,工业装配、组装、生产线、传动与控制技术,搬运技术。此外还有一系列的配备活动,如:2014深圳环境、食品药品安全、分析检测及生命科学技术交流会”、“智能化仪器仪表与物联网技术交流会”包括“深圳实验室主任交流会”、“深圳高校技术物资需求座谈会”、“生化仪器设备用户座谈会暨需求信息说明会”等会议与学术活动。

发布时间:17-05-03 14:49分类:技术文章 标签:PCR仪,PCR仪百科简介
摘要:简单的说,PCR*是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。PCR简介PCR的要素基本的PCR须具备1.要被复制的DNA模板
Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq.
Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的PCR的反应包括三个主要步骤分别是1.
Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓
Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,
将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板. 而Annealing 则是令
Primers于一定的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。
*后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长
Extension of
primers及另一股的合成。PCR的*早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年*早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。PCR的实现1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis
等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制PCR的改进与完善Mullis*初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌
DNA 聚合酶 I 的Klenow片段,其缺点是:①Klenow酶不耐高温,
90℃会变性失活,每次循环都要重新加。②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点,但由于Klenow酶不耐热,在DNA模板进行热变性时,会导致此酶钝化,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。1988年初,Keohanog改用T4
DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。1988年Saiki
等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌thermus aquaticus
中提取到一种耐热DNA聚合酶。此酶具有以下特点:①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度2.0Kb。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶IKlenow片段区别,将此酶命名为TaqDNA多聚酶Taq
DNAPolymerase。此酶的发现使PCR广泛的被应用。PCR仪的分类普通的PCR仪把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。梯度PCR仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常有12种温度梯度,这样的仪器*叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其*适退火温度事不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,*可以筛选出表达量高的*适退火温度,进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。主要用于科研,教学机构。梯度PCR仪,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。原位PCR仪用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。实时荧光定量PCR仪在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,*成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这PCR仪叫做实时荧光定量PCR仪(qPCR仪)。荧光定量PCR仪有单通道,双通道,和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。该仪器主要用于医学临床检测,生物医药研发,食品行业,科研院校等机构。获得诺贝尔奖的PCR技术1995年,美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖,他所取得的成*是发明了PCR技术。PCR,中文译为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高*象核裂变的“链式反应”那样。PCR技术通过两个短的称为引物的
DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。这种技术一问世,立刻引起了分子生物学研究的一场革命,人们利用
这种轰动全的技术很快*把微观领域的生物学研究大大地往前推了一步。可以这么说,PCR技术使分子生物学研究一下子获得了突破,而且随着PCR技术的
日趋完善,PCR在人类社会生活中的应用也越来越广泛。比如说在“DNA指纹”
中我们提到,科学家们只需要一根头发甚至一个细胞*可以完成DNA指纹的鉴定工作,这里实际上*要采用PCR技术,因为一个细胞中的DNA含量实在太少
了,人们根本不可能检测到它的指纹;有了PCR技术*好办了,通过PCR技术把这个细胞中的DNA片断扩增1000万倍,这样DNA量*足够作指纹鉴定了。
再比如,在医院里检验血液中的某种病毒,有时病毒量极少(例如有的艾滋病病毒携带者),通过传统的检查方法费力又费时,这时PCR技术也许*可以帮上忙。
可以*选定这种病毒DNA上的一段DNA,设计合适的引物DNA,然后通过PCR技术一扩增很快*可以判断出血样中是否扩增出了大量的DNA,如果是的
话,那么*说明血样中带有该种病毒了。PCR方法不但有极高的灵敏度,而且可以同时一次做近百个扩增反应,省时省力效率高。PCR技术神奇*神奇在以下几个特点上:一是被扩增的DNA所需量极小,理论上讲一个分子*可以用于扩增了;二是扩
增效率高,目的基因的量成指数形式扩增,几个小时*扩增1000万倍以上。现在PCR技术已经被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监
测等诸多方面,真不愧是“获得诺贝尔奖”的好技术!北京熙缜隆博环保科技有限公司是经销进口仪器设备的供应商,我们的产品优惠,质量保证,原装进口,欢迎前来选购!

发布时间:17-05-03 14:41分类:技术文章
标签:氮气吹干仪,氮吹仪,氮气吹干仪百科知识
摘要:新消息,北京熙缜隆博环保科技有限公司近日又引进一台新款式氮吹仪–美国ORGANOMATION
N-EVAP氮吹仪,该款氮吹仪是目前上**进的前处理设备之一,在业内享有很好的口碑,同时价格便宜,欢迎大家前来选购N-EVAP氮吹仪。百科名片氮气吹干仪(Termovap
Sample
Concentrator)又称为:氮气浓缩装置、氮气吹扫仪,简称:氮吹仪、吹氮仪,是用于液相、气相及质谱分析中的样品制备,采用国际认可技术,通常将氮气吹入加热样品的表面进行样品浓缩,具有省时、操作方便、容易控制等到特点,可很快得到预期的结果。广泛应用于农残分析、商检、食品、环境、制药、生物制品等行业。产生背景“农产品及产地环境中农药多残留快速检测技术(MRSM)”是农业部环保所与农业部环境监测总站组织实施引进的国际*进农业科学技术项目。中华人民共和国*
质量监督检验检疫总局、中国*标准化管理委员会又于2008-10-07发布的《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》GB/T
22388—2008要求利用氮气吹干仪对牛奶等乳制品中的三聚氰胺进行样品前处理。产品应用它在制药、食品安全、特别是婴幼儿乳品、医学测试、农药残留方面发挥了实际效用,为气相色谱(GC)、液相色谱(HPLC)等分析手段中样品的制备和处理提供了省时高效的平台,是SPE固相萃取技术的*佳配套设备。主要分类1.
按仪器加热槽结构分为:方形与圆周型氮吹仪2.
按仪器加热方式分为:金属干浴式与水浴式氮吹仪本文出自北京熙缜隆博环保科技有限公司,温馨提醒:如您需采购仪器仪表类产品,可致电:010-68940148。我们将有的销售人员为你提供相关产品咨询服务。

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